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苔黑酚试剂测RNA含量

点击次数:818   发布时间:2019/5/21 9:28:53

   苔黑酚为白色菱形结晶。熔点58℃,无水物熔点107-108℃。沸点289-290℃,165-170℃(1.87-2.67kPa),147℃(0.67kPa)。相对密度1.290(4/4℃)。苔黑酚易溶于水、醇和醚,略溶于苯,微溶于氯仿和二硫化碳。苔黑酚在空气中易氧化变成红色。有甜但令人不愉快的气味。
   RNA含量测定,除可用紫外吸收法及定磷法外,常用地衣酚法测定。其反应原理是:当RNA与浓盐酸共热时,即发生降解,形成的核糖继而转变成糠醛,后者与3,5-二羟基甲苯(地衣酚orcinol)反应,在Fe3+或Cu2+催化下,生成鲜绿色复合物。反应产物在670nm处有吸收。RNA浓度在20―250μg・ml-1范围内,光吸收与RNA浓度成正比。地衣酚法特异性差,凡戊糖均有此反应,DNA和其他杂质也能与地衣酚反应产生类似颜色。因此,测定PNA时可先测得DNA含量再计算RNA含量。

  如何排除苔黑酚RNA含量测定中的影响因素?
  微量 DNA 无影响,较多 DNA 存在时,亦有干扰作用.如在试剂中加入适量 CuCl2 · 2H2O 可减少 DNA 的干扰,甚至某些已糖在持续加热后生成的羟甲基糖醛也能与地衣酚反应,产生显色复合物.此外,利用 RNA 和 DNA 显色复合物的光吸收不同,且在不同时间显示色度加以区分.反应 2min 后,DNA 在 600nm 呈现光吸收,而 RNA 则在反应 15min 后,在 670nm 下呈现光吸收。

  生物试剂的使用常识:
(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。      信帆生物技术有限公司,是一家集专业供应科研类试剂盒以及生物和化学科研试剂为主的高科技企业。公司以多所著名高校的科研技术力量为依托,以的检测标准和完备的生产设施为保证,凭借着高品质的产品,良好的信誉,优质的服务,产品畅销全国近三十多个省、市、自治区的科研机构和院校。

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