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点击次数：4603 发布时间：2019/5/23 14:03:38
涨知识了！免疫组化包埋和切片原来那么简单
上海信帆生物提供免疫组化实验代测服务，提供免疫荧光检测服务，我们从老师样本采集到文章发表整个实验过程，提供全程技术指导和售后服务。实验检测周期短，确保每一份实验数据均真实可靠。
1、固定：组织浸没于4%多聚甲醛24 h。
2、脱水：取出固定材料，修整使切面平整，置入梯度酒精。
（1）75%酒精中脱水4h；
（2）85%酒精中脱水2 h；
（3）90%酒精中脱水2 h；
（4）95%酒精中脱水1 h；
（5）100%酒精Ⅰ中脱水30 min；
（6）100%酒精Ⅱ中脱水30min。
3、透明：
（1）无水乙醇二甲苯中透明15-30min；
（2）二甲苯Ⅰ中透明15-30min；
（3）二甲苯Ⅱ中透明15-30min（观察透明效果）。
4、浸蜡包埋：
（1）石蜡Ⅰ中浸蜡1h；
（12）石蜡Ⅱ中浸蜡1h；
（13）石蜡Ⅲ中浸蜡1h
（14）包埋机包埋，修蜡块。
5、修块：将蜡块外部不整齐的部分切去，使蜡块形状规则便于切片。
6、切片：将修整好的蜡块置于石蜡切片机上连续切片，片厚4μm。
7、摊片：将切片漂浮于40℃温水表面展平，然后用防脱处理过的载玻片捞起，8、烤片及保存：放进60℃烘箱内烘烤，烘烤结束后室温保存备用。
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
这些常用免疫组织化学方法的原理如下：
1. 免疫荧光细胞化学技术
将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.
2. 免疫酶细胞化学技术
是目前免疫组织化学研究中*常用的技术．基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究．
3. 免疫胶体金技术
就是用胶体金标记一抗，二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白）等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性，定位或定量研究．由于胶体金的电子密度高，多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究．
原创作者：上海信帆生物科技有限公司
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