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点击次数:1913 发布时间:2020/7/28 10:37:16
HE染色液和TTC染色液,它们二者的区别您了解吗?
TTC染色液与HE染色液的区别是什么,首先我们要先了解一下什么是TTC染色液,什么是HE染色液。
HE染色是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中*基本、使用*广泛的技术方法。
TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲月赞,用来表示细胞的活力.配制多为2%,染色要避光,37度条件下,它是评价脑缺血损伤常用的指标。
TTC染色液与HE染色液的区别是什么
1、染色原理
TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,1894年首次合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。
苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。
织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
2、配制方法
TTC溶液的配制
取3g TTC溶于1L蒸馏水或冷开水中,配制成0?1%的TTC溶液。药液PH应在6?5~7?5,以PH试纸试之(如不易溶解,可先加少量酒精,使其溶解后再加水)。
HE染色液配制
Harris氏苏木素(1990)
苏木素 2.5g
无水酒精 25ml
硫酸铝钾(钾明矾)50g
蒸馏水 500ml
黄*色氧化汞 1.25g
冰醋酸 20ml
配制时,先将苏木素溶于酒精(平时也可将苏木素以10%的浓度溶解好,贮存备用),取一2000ml的烧杯,倾入钾明矾,加入蒸馏水,于电炉上加热,熔解钾明矾,完全熔解后,待温度至90℃左右时,加入预先溶解好的酒精苏木素,继续加热至沸腾,延续3-5min,此时溶液逐渐加深,变为紫红色,拔离电源,加入黄*色氧化汞,当充分氧化后,重新插上电源继续加热3-5min,此时溶液变深紫色,拔去电源,直接将烧杯插入预先备好的冰水里,放于暗处,第二天过滤后加入冰醋酸,即可使用三个月,但据我们的实践及多年的经验认为,只要掌握好切片的“无水化”,该染液可反复使用达一年之久。
HE染色液和TTC染色液,它们二者的区别您了解吗?