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大鼠睾酮(T)酶联免疫检测试剂盒操作总结

点击次数:185   发布时间:2024/4/17 14:40:28

 大鼠睾酮(T)酶联免疫检测试剂盒操作总结


使用目的:
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中睾酮(T)含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠睾酮(T)水平。用纯化的大鼠睾酮(T)抗体包
被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入睾酮(T),再与HRP 标记的睾酮(T)
抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在
HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的
睾酮(T)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品
中大鼠睾酮(T)浓度。
操作程序总结
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月

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