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ACTH放射免疫实验检测服务找上海信帆生物

阅读次数:54 发布时间:2019/6/28 9:51:10

ACTH放射免疫实验检测服务找上海信帆生物

ACTH是由垂体前叶细胞分泌的39个氨基酸组成的直链多肽,分子量4500,在循环中的半衰期仅为10~25min。ACTH的生理作用为促进肾上腺皮质增生、合成和分泌皮质类固醇,同时也促时肾上腺素、生长激素合成。ACTH的合成和分泌受下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素以及加压素的调节。我们利用ACTH的18~39片段的特异抗体,建立了特异、灵敏的测定血浆、体液中ACTH18-39片段的放射免疫分析方法。该抗体也能同组织、细胞切片中特异的ACTH和体外纯化的ACTH特异结合,用于临床组织化学诊断ACTH水平变化。因此该方法适用于肾上腺皮质功能亢进、异位ACTH综合征、肾上腺腺瘤上腺皮质功能减退等诸多临床疾病时血浆ACTH水平的监测。

1.激素类检测:⑴在垂体性腺激素:卵泡刺激素(FSH),黄体生成激素(LH),睾丸酮(T),雌二醇(E2),孕酮(P),催乳素(PRL),人生长激素(HGH),人绒毛膜促性腺激素(HCG),人胎盘催乳素(HPL)等。⑵甲状腺腺激素。
2.肿瘤类检测:甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA),糖蛋白抗原(CA19-9),糖蛋白抗原(CA-125,CA15-3),β2微球蛋白(β2-MG),铁蛋白放射免疫分析(SF),前列腺特意抗原(PSA)。
3.放射受体分析:受体是存在于细胞表面、胞浆或细胞核内的生物活性物质,其功能是和细胞外的信息分子(配体)特异性结合,将信息转变为生物效应。放射受体分析(radioreceptorassay,RRA)或受体的放射配体结合分析(radioligand binding assay,RBA)是建立在放射性标记配体与受体之间的结合反应,它是目前对受体分子进行定量和定位分析研究的灵敏、可靠的一项技术。临床上[5]最常见的就是TRAb放射受体分析,血清中TRAb对甲亢与甲减的病因诊断有重要的意义。此外,在生物设计、药物作用机理、生物效应及疾病的病因探讨、诊断和治疗等方面的应用已有较大发展。
放射微生物分析法(radiomicrobiologic assay)以特异微生物作为结合剂,如用某种微生物测定叶酸。
糖皮质激素对下丘脑及垂体前叶起着长负反馈作用,抑制CRH及ACTH的分泌。在生理情况下,下丘脑、垂体和肾上腺三者处于相对的动态平衡中,ACTH缺乏,将引起肾上腺皮质萎缩、分泌功能减退。ACTH还有控制本身释放的短负反馈调节。

ACTH口服后在胃内被胃蛋白酶破坏而失效,只能注射应用。血浆t1/2为15分钟。它在正常人的血浆浓度,晨8时为22pg/ml,晚10时为9.6pg/ml。其主要作用是促进糖皮质激素分泌,但只有在皮质功能完好时方能发挥治疗作用。一般在给药后2小时,皮质才开始分泌氢化可的松。临床用于诊断脑垂体前叶-肾上腺皮质功能水平及长期使用皮质激素的停药前后,以防止发生皮质功能不全。由于ACTH易引起过敏反应(因临床应用制剂来自牛、羊、猪垂体),现已少用。


标准ACTH 溶液:使用前用缓冲液1ml溶解,混匀。2~8℃避光保存,在标识的有效期内稳定,浓度分别为0、5、15、45、135、405pg/ml。

125I- ACTH溶液:使用前用缓冲液(100管10.5ml溶解,50管5.5ml

溶解),混匀。如一次加样超过100管,两瓶混合后使用;2~8℃避光保存标识的有效期内稳定。

 

兔抗-ACTH  抗血清:使用前用缓冲液(100管10.5ml溶解,50管5.5ml

溶解),混匀。如一次加样超过100管,两瓶混合后使用;2~8℃避光保存标识的有效期内稳定。

 

驴抗兔免疫分离试剂:1瓶,液体,2~8℃保存,在标识的有效期内稳定。加样前必须摇匀!

 

取静脉血2ml,注入含10%EDTA二钠30ul的试管中,混匀4℃,3000rpm离心10 min,分离血浆,待测;如不立即测量,可将样本密封后,置于2~8℃或-20℃储存备测,2~8℃保存不应超过48小时,-20℃保存不超过2个月。冰冻样品测定前,

2.手工作图或计算器处理:

1).百分结合率计算:设S0管计数为B0,各标准管或样品管计数为B,非特异管计数为NSB,则百分结合率计算公式如下:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%

2).logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式如下:

    logit=ln(B/ B0)/(1-B/ B0)

3)手工作图:以标准浓度取log值为横坐标,对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标,对应的B/B0为纵坐标在logit-log坐标纸上画出标准曲线(理想化时是一条直线)。根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意:如果使用普通坐标纸,查出的数值应取反对数才是最后的浓度值。

4).计算器处理;使用有线性拟合功能的计算器,可以比较方便地计算出样品浓度值,具体操作方法请查阅计算器的使用说明书。

本测定盒主要技术指标

1.标准范围:5—405pg/ml

2.灵敏度:<5pg/ml

3.批内变异系数(CV):<10%;

 批间变异系数(CV):<15%

提供ACTH放免试剂盒,ACTH放免实验检测


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