如何避免ELISA实验中出现的各种问题

点击次数：606 发布时间：2023/5/6 15:57:35

如何避免ELISA实验中出现的各种问题

ELISA实验失败可能由多种因素造成。在实验前阅读并充分了解产品说明书，可以一定程度上避免出现意想不到的结果。参考以下提示来避免实验出现问题。

1. 检查试剂盒的保质期，保证所有试剂按说明书上的建议正确保存；

2. 检查试剂溶液是否存在不稳定或降解迹象，如沉淀或变色等；

3. 底物溶液应为无色；

4. 试剂制备和保存时应使用干净的一次性塑料吸量管、枪头和容器。每次加液（样品、标准品及其他试剂）时，及时更换枪头，避免交叉污染；

5. 确保孵育时间和温度与规定的高度一致；

6. 盒中试剂不能用其他试剂替代；

7. 建议样本和标准品都做复孔，以提高实验结果的准确性。

如何避免ELISA实验中出现的各种问题

移液技术
1. 移液时，枪头应对准孔中央，避免接触孔壁及底部。
2. 移液后轻轻晃动混匀试剂。
3. 如果您的样品具有黏性，请预先润洗枪头以消除表面张力的影响。吸液时等待片刻使体积平衡后再取出。
4. 移液不充分或移液体积不均，说明移液器需要校正。必要时请检查移液器并重新校正。
5. 加样时，不同的试剂标准品和样本间都要确保更换枪头，避免交叉污染。
6. 确保使用合适的枪头。不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积。

洗涤技术
1. 如果使用自动洗板机或多通道移液器，请确保进出口能正常运作。
2. *后一次洗涤后，翻转酶标板倒出多余的洗涤液，并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低精确度。不能让孔内液体自然风干，需立即进行下一步操作。
3. 按照说明书，添加足量的洗涤液至孔内，并保证洗涤完全。
4. 由于洗涤液不是通用的，当试剂盒内的洗涤液用完时，请不要使用其他试剂盒中的洗涤液。如有需要，可联系技术支持寻求帮助。
5. 不要减少或增加洗涤时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤。
6. 按照说明书上推荐的洗涤次数清洗，随意改变洗涤的次数会影响实验的精确性。

贮液瓶
为避免污染，不同的试剂使用不同的贮液瓶。一些试剂或样本很容易被污染（比如唾液、氧化剂等），请参考说明书操作。必要时候采取一些预防措施保护溶液。另外，要保证盛放试剂或洗液的加样槽的清洁度，避免造成污染。